牦牛骨胶原蛋白促成骨活性肽分离纯化及结构鉴定

叶孟亮  张春晖  朱玲玉  贾伟   张鸿儒

中国农业科学院农产品加工研究所安徽农业大学茶与食品科技学院

摘要：

牦牛（Bos grunniens）是我国珍贵的畜种资源,牦牛骨中含有丰富的胶原蛋白（约占21.5%）,补充胶原蛋白肽可以增加骨胶原纤维网架的规则性和牢固性。深入开展对牦牛骨精深加工技术的研究探讨,充分利用牦牛骨中丰富的骨胶原蛋白开发功能性食品,对提高牦牛附加值、增加藏区牧民收益、促进牧区社会经济发展和稳固边疆具有重要意义。

本研究以前期实验室制备得到的牦牛骨胶原蛋白肽为研究对象,利用超滤、体积排阻色谱、反向液相色谱和液相色谱串联质谱联合Mascot 2.4 search engine技术对牦牛骨胶原蛋白肽进行了进一步分离、纯化和结构鉴定。

结果表明,经超滤后收集得到的组分UF-Ⅳ（Mw <3 kDa）表现出较高的促成骨细胞增殖活性;经SuperdexTM peptide 10/300 GL色谱柱（体积排阻色谱法）分离后,组分SP-Ⅲ表现出较高的促成骨细胞增殖活性,在0.5 mg/mL作用浓度下,促成骨细胞增殖率高达160.6%;经RP-HPLC分离纯化,组分SP-Ⅲ经Innoval C18色谱柱进一步分离后的组分F8表现出较强的促成骨细胞增殖活性（190.6%）。利用反向液相色谱串联质谱法联合Mascot 2.4 search engine对其氨基酸序列进行测定,共鉴定得到35条肽段。基于相对丰度、分子量、比对标准得分等指标筛选出9条具有较高潜在促成骨细胞增殖活性肽进行化学合成验证其体外生物活性,GPAGPPGPIGNV（GP-12）肽相较其它8条肽段具有更高的促成骨细胞增殖活性（142.7%）。

综上,牦牛骨胶原蛋白肽在未来工业生产功能性和促进营养健康的食品中具有很大的应用潜力,可用于介导治疗骨质疏松症。

关键词：牦牛骨;成骨活性;多肽;细胞增殖;鉴定;

牦牛骨及其功效活性研究进展

刘宇  史梦妮  付骞卉  苏玉平   崔箭

中央民族大学药学院

摘要：

牦牛骨密度大,骨质优良,富含胶原蛋白、氨基酸、软骨素、维生素以及Ca、P、Mg、Zn等矿物元素和人体所需的微量元素,是一种天然的补钙剂。因此本文参考近5年牦牛骨研究,分析了牦牛骨中有效成分及胶原蛋白的含量和提取分离方法,并阐述了牦牛骨的相关功效,为进一步探讨牦牛骨的开发利用提供了思路和途径。 

关键词：牦牛骨;胶原蛋白;综述;

基金资助：国家自然科学基金项目（No.81273872）；

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